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哇塞，超全子宫内膜异位动物模型构建！

Time：2024-04-19
EMT动物模型主要分为自发性、诱发性及种植性三类方法

子宫内膜异位症（endometriosis，EMT）指子宫腔内具有活性的内膜组织出现在子宫腔以外的位置，是一种常见的妇科疾病。异位的内膜周期性出血及其周围组织纤维化，导致异位结节，痛经，慢性盆腔痛，月经异�：筒辉械�，对患者的生活质量和心理健康都带来严重的影响。

目前对EMT的研究集中在药物疗效，病理机制等方面。由于伦理道德的原因，很难对患病妇女进行全程观察，也不能进行创伤性、侵袭性或者对照性实验研究。因此，动物模型成为研究该病的重要手段。
 EMT动物模型主要分为自发性、诱发性及种植性三类方法。自发性的周期长、成本高，且实验动物必须有规律的月经周期；种植法又称异体移植法，将人的异位内膜组织种植于实验动物体内，处于医学伦理的考虑，此法不适用于实验研究的推广；诱发性方法中，手术移植法最为常用，分为同种异体移植法和自体移植法两种。同种异体移植法避免对实验动物子宫完整性的破坏，对受体动物创伤性较�。形恼掠酶梅ǔ赡Ｂ士纱锏�66.7%。但该法使用率不高，可能实验动物对同种属来源的内膜组织免疫排斥等因素导致成模率不太稳定。自体移植法成模率较高，对实验动物要求不高，成本低廉，因此自体移植法构建EMT动物模型成为该领域实验研究的主要方法，多用来观察EMT的免疫发病机制和药物治疗作用，也是我们今天主要介绍的方法。

灵赋拓普之�。�

SPF级SD大鼠，雌性，动情周期规律，6-8周。
操作方法：术前使用小剂量雌激素使子宫内膜充血水肿，增加血液循环，有利于移植物存活、生长。
麻醉小鼠后，于腹部正中做小切口。切除左侧子宫角，放入生理盐水中。将子宫内膜从肌肉中剥离，然后切成小块(5mm)。在腹壁上做一个皮下口袋，然后将子宫碎片朝向腹肌放置在口袋中。术后立即皮下注射苯甲酸雌二醇30?g/ kg，连续10d，建立大鼠子宫内膜异位症模型。
  
造模之后，不要忘记肌注雌二醇，有利于移植的内膜生长。
成模判断标准
建模两周后，开腹，观察移植物的生长情况：
符合以下条件者为成功模型：
移植物体积增大，呈隆起透亮的小囊状，有些形成多房囊肿，内有液体积聚且积液高度≥2mm，外被结缔组织或大网膜覆盖并有血管生成；游标卡尺测量移植物的体积≥8mm3；切取移植物送病检，证实是存活的异位子宫内膜组织。


  实验设计举例

     



动物处死后开腹探查异位灶面积，形态，位置，有无粘连等
取异位灶进行HE染色，观察子宫内膜腺体和间质。

         
                 HE染色

   

        
                             免疫组化检测


数据来源：Mert Ilhan，Zulfiqar Ali，Ikhlas A. Khan，Hakk? Tas? tan，Esra Küpeli Akkol，The regression of endometriosis with glycosylated flavonoids isolated from Melilotus officinalis (L.) Pall. in an endometriosis rat model，Taiwanese Journal of Obstetrics & Gynecology 59 (2020) 211e219.

                                       

                             Western blot

数据来源：Rosalba Siracusa，Ramona D’Amico，Daniela Impellizzeri，Marika Cordaro，etc，Autophagy and Mitophagy Promotion in a Rat Model of Endometriosis，Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 5074.

  免疫荧光

数据来源：Wenliang Su， Huan Cui，Danning Wu，Jiawen Yu， Lulu Ma，etc. Suppression of TLR4-MyD88 signaling pathway attenuated chronic mechanical pain in a rat model of endometriosis， Su et al. Journal of Neuroinflammation (2021) 18:65.

根据具体的实验需求，还可以把内膜移植到所需位置，如卵巢包膜输卵管、子宫系膜、肠系膜及腹壁的各部、腓肠肌等。



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